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布魯氏菌檢測試劑盒測量原理和流程分別是怎樣的?

更新時間:2022-12-15點擊次數:643
  布魯氏菌病是一種亞急性或慢性的疾病,可造成多種動物發病,本質上是一種動物疾病,特別是家畜易發病,由布魯氏菌屬的細菌引起發病,人類可作為宿主偶爾攜帶這類細菌。偏好與人畜共患病潛能特征有差異的細菌,主要為:羊布魯氏菌,豬布魯氏菌,流產布魯氏菌和犬布魯氏菌。
  布魯氏菌檢測試劑盒利用實時熒光PCR原理,主要用于布魯氏菌的定性篩查檢測。檢測原理如下:
  以基因工程表達布魯氏菌蛋白作檢測和捕獲抗原,采用“雙抗原夾心法”膠體金免疫技術設計,標記膠體金的抗原與樣本中特異性抗體形成復合物,復合物在NC膜爬行的過程中與被包被在檢測線上的抗原特異性結合而被固定和富集于檢測線,使檢測線顯紅色反應,以試劑檢測線顯色與否反應來判斷樣品是否存在布魯氏菌抗體。
  布魯氏菌檢測試劑盒操作步驟:
  1.從試劑盒中分別取出熒光反應液、陰性對照、陽性對照。
  2.在室溫下溶解后,充分震蕩混勻,瞬時離心。
  3.取出PCR八連管,放在PCR板上。
  4.在PCR八連管內分裝熒光反應液,分別向多個PCR管中加入提取好的樣品核酸,其余兩個管內分別加入陰性對照和陽性對照。完成后蓋上管蓋,并在右上角做好標記。
  5.將標記好的PCR八連管放入儀器震蕩混勻后瞬時離心,取出后拿起觀察有無氣泡。
  6.打開熒光定量PCR儀器,將PCR八連管放入卡槽中,蓋上儀器。
  7.點擊實驗程序,選擇新建實驗,點擊運行程序,并按照PCR八連管標記順序依次選擇孔位信息:待測樣本、陽性對照、陰性對照。
  8.點擊開始按鈕,運行實驗。
  9.實驗完成后,在屏幕查看實驗結果,點擊詳細數據可查看實驗數據,進行數據回顧。
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